密闭熏蒸消毒是目前国内高等级生物安全实验室常用的消毒方式，以试验室房间为单元，关闭送排风机组、风管密闭阀和实验室门，是实验室处于密闭状态，在房间内发生消毒剂气体或房间外发生消毒剂气体通过专用消毒管道注入实验室。

在房间内发生消毒剂气体的密闭熏蒸消毒方法：将消毒设备主机推进待消毒的实验室内，微电脑控制台放在辅助区的某房间内，数据线经墙体孔洞穿管接出或通过传递窗接出，传递窗周边缝隙用无残留胶布密封。

在房间外发生消毒剂气体的密闭熏蒸消毒方法：消毒设备主机放置在实验室外，将消毒剂气体注入口和气流返回口与墙体上固有的消毒口连接。为保证实验室内消毒气体分布均匀及充分交换，可进一步采用塑料管连接墙体上的消毒剂气体注入口，将塑料管另一端深入实验室中心位置，高度50~100cm，注入口和返回口相隔距离约2.5m，实验室内两对角放置两台可左右旋转的电风扇。此消毒方式也可设置特定的消毒管道接入房间顶棚，在顶棚接管处设置消毒剂喷头。

以上两种密闭熏蒸消毒方式，鉴于房间内发生消毒剂气体的方法在操作时需要将消毒设备主机推入房间，因此在大多数情况建议使用房间外发生消毒剂气体的方法进行密闭熏蒸消毒。

密闭熏蒸消毒存在一定的风险：采用密闭熏蒸消毒时，若存在多个核心工作间，当没有多个消毒设备可以同时进行消毒时，消毒中、消毒后和未消毒的房间存在彼此污染的风险，甚至会污染吊顶、外围走廊等周围环境。因此应根据实际情况进行风险分析，当风险较大时，应采取相关措施降低风险。对于国内常规的三级生物安全实验室，在没有意外事故发生时，正常情况下室内被污染的概率较小；实验室密闭熏蒸消毒时从围护结构缝隙泄漏出来的空气量较少，而且大部分实验室在进行消毒时，一般会用胶带密封实验室门缝及其他课件缝隙来降低泄漏概率。根据国内多数三级生物安全实验室的多年实践，一般情况下密闭熏蒸消毒时上述一些潜在的生物安全风险在可接受范围内。生物安全防护级别较高的大动物三级生物安全实验室及四级生物安全实验室对围护结构气密性要求较高，需要进行恒压法、压力衰减法气密性验证，当采用密闭熏蒸消毒模式时，实验室围护结构的高度气密性对降低污染物外泄风险有重要意义。

参考文献《生物安全实验室设计与建设》。

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